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考马斯亮蓝溶液的配制方法如下,分两种常见配方说明:
一、考马斯亮蓝G-250溶液配制(常规染色液)
- A液:
1 mol/L 盐酸溶液
- B液:1 g/L 考马斯亮蓝G-250溶液
- 混合比例:1 mL A液 + 15 mL B液,加水至1 L。
- 需在染色时现场混合,避免提前配制导致沉淀或颜色异常。
二、考马斯亮蓝R-250脱色液配制(用于蛋白质纯化)
试剂组成
- 考马斯亮蓝R-250: 0.25 g(或0.5 g,按比例调整) - 溶剂
- pH调节:通常使用冰乙酸调节至pH 5.0-6.0。
配制步骤
- 称取考马斯亮蓝后溶解于溶剂中;
- 加入冰乙酸调节pH;
- 定容至1 L,过滤后冷藏保存。
注意事项
两种配方中,G-250与R-250为不同类型考马斯亮蓝,用途不同(G-250用于染色,R-250用于蛋白质脱色);
配制时需严格按比例操作,确保浓度准确;
常规染色建议现配现用,脱色液可长期保存。