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考马斯溶液怎么配制

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考马斯亮蓝溶液的配制方法如下,分两种常见配方说明:

一、考马斯亮蓝G-250溶液配制(常规染色液)

考马斯溶液怎么配制

试剂组成

- A液:

1 mol/L 盐酸溶液

- B液:1 g/L 考马斯亮蓝G-250溶液

- 混合比例:1 mL A液 + 15 mL B液,加水至1 L。

关键要点

- 需在染色时现场混合,避免提前配制导致沉淀或颜色异常。

二、考马斯亮蓝R-250脱色液配制(用于蛋白质纯化)

考马斯溶液怎么配制

试剂组成

- 考马斯亮蓝R-250:

0.25 g(或0.5 g,按比例调整)

- 溶剂:甲醇45 mL + 冰乙酸10-100 mL(根据浓度需求调整) + 蒸馏水450-850 mL

- pH调节:通常使用冰乙酸调节至pH 5.0-6.0。

配制步骤

- 称取考马斯亮蓝后溶解于溶剂中;

- 加入冰乙酸调节pH;

- 定容至1 L,过滤后冷藏保存。

考马斯溶液怎么配制

注意事项

两种配方中,G-250与R-250为不同类型考马斯亮蓝,用途不同(G-250用于染色,R-250用于蛋白质脱色);

配制时需严格按比例操作,确保浓度准确;

常规染色建议现配现用,脱色液可长期保存。

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